BspQI
BspQI ka recombinantly eksprime nan E. coli ki ka rekonèt sit espesifik epi yo pwodui anba
BspQI, yon endonuclease restriksyon endonukleaz IIs, sòti nan yon souch E. coli recombinant ki pote gen BspQI klone ak modifye ki soti nan Bacillus sphaericus.Li ka rekonèt sit espesifik, ak sekans rekonesans ak sit klivaj yo jan sa a:
5' · · · ·GCCTTC(N) · · · · · · · · · · ·3'
3' · · · · CGAGAAG(NNNN) · · · · 5'
Karakteristik pwodwi
1. Aktivite segondè, dijesyon vit;
2. Aktivite zetwal ki ba, asire koupe egzat tankou "scalpel";
3. San BSA ak orijin bèt gratis;
Methylation sansiblite
Dmethylation:Pa sansib;
Dcm metilation:Pa sansib;
CpG Methylation:Pa sansib;
Kondisyon depo
Pwodwi a ta dwe anbake ≤ 0℃;Sere nan -25 ~ - 15 ℃ kondisyon.
Tanpon depo
20mM Tris-HCl, 0.1mM EDTA, 500mM KCl, 1.0mM dithiothreitol, 500 µg/ml Recombinant Albumin, 0. 1% Trition X- 100 ak 50% gliserin (pH 7.0 @ 25°C).
Definisyon inite
Yon inite defini kòm kantite anzim ki nesesè pou dijere 1µg ADN kontwòl Entèn nan 1 èdtan nan 50 °C nan yon volim reyaksyon total de 50 µL.
Kontwol kalite
Pwoteyin Pite Egzamen (SDS-PAGE):Pite BspQI te ≥95% detèmine pa analiz SDS-PAGE.
RNase:10U nan BspQI ak 1.6μg MS2 RNA pou 4 èdtan nan 50 ℃ pa bay okenn degradasyon jan yo detèmine pa elektwoforèz jèl agarose.
Aktivite DNase ki pa espesifik:10U nan BspQI ak 1μg λ ADN nan 50 ℃ pou 16 èdtan, konpare ak 50 ℃ pou 1 èdtan, pa bay okenn ADN depase jan yo detèmine pa elektwoforèz jèl agarose.
Ligasyon ak koupe:Apre dijesyon 1 μg λDNA ak 10U BspQI, fragman ADN ka ligase ak T4 DNA ligase nan 16ºC.Ak fragman ligated sa yo ka koupe ak BspQI.
E. coli ADN: E. coli 16s rDNA-espesifik TaqMan qPCR deteksyon te montre ke rezidi genomic E.coli ≤ 0.1pg/ul.
Rezid pwoteyin lame:≤ 50 ppm
Bakteri Endotoxin: LAL-tès, dapre Chinwa Pharmacopoeia IV 2020 edisyon, metòd tès limit jèl, règ jeneral (1143).Kontni endotoxin bakteri yo ta dwe ≤10 EU/mg.
Sistèm reyaksyon ak kondisyon yo
| Eleman | Volim |
| BspQ mwen (10 U/μL) | 1 μL |
| ADN | 1 μg |
| 10 x BspQ mwen tanpon | 5 μL |
| dd H2O | Jiska 50 μL |
Kondisyon reyaksyon: 50 ℃, 1 ~ 16 h.
Inaktivasyon chalè: 80 ° C pou 20 min.
Sistèm reyaksyon rekòmande ak kondisyon yo ka bay efè dijesyon anzim relativman bon, ki se pou referans sèlman, tanpri al gade rezilta eksperimantal yo pou plis detay.
Aplikasyon pwodwi
Restriksyon endonukleaz dijesyon, klonaj rapid.
Nòt
1. Volim anzim ≤ 1/10 volim reyaksyon an.
2. Aktivite zetwal ka rive lè konsantrasyon glycerol plis pase 5%.
3. Aktivite klivaj ka rive lè Substrate anba rapò rekòmande a.
