Bst 2.0 DNA Polymerase (san glisewol, gwo dansite)
Bst DNA polymerase V2 sòti nan Bacillus stearothermophilus DNA Polymerase I, ki gen 5′→3′ ADN polymerase aktivite ak gwo aktivite ranplasman chèn, men pa gen aktivite 5′→3′ exonuclease.Bst DNA Polymerase V2 se depreferans apwopriye pou strand-deplasman, izotèmik anplifikasyon LAMP (Loop medyatè izotèmik anplifikasyon) ak sekans rapid.Sa a Bst DNA polymerase V2 se kapab anpeche aktivite ADN polymerase nan tanperati chanm, pou ke li ka opere ak sistèm reyaksyon an ka formul nan tanperati chanm, anpeche anplifikasyon ki pa espesifik ak amelyore efikasite nan reyaksyon an, ak vèsyon sa a ka. dwe lyofilize.Anplis de sa, li se kapab lage aktivite li nan tanperati ki wo, kidonk elimine nesesite pou yon etap aktivasyon separe.
Eleman
| Eleman | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
| Bst DNA polymerase V2 (san glisewol) (32U/μL) | 0.05 ml | 0.25 ml | 2.5 ml |
| 10×HC Bst V2 tanpon | 1.5 ml | 2 × 1.5 mL | 3 × 10 mL |
| MgSO4 (100mM) | 1.5 ml | 2 × 1.5 mL | 2 × 10 ml |
Aplikasyon
1.LAMP izotèmik anplifikasyon
2.ADN seksyon sèl reyaksyon deplasman
3.Sekans jèn GC segondè
4.Sekans ADN nan nivo nanogram.
Kondisyon Depo
Transpò anba 0 ° C epi yo dwe estoke nan -25 ° C ~ -15 ° C.
Definisyon inite
Yon inite defini kòm kantite anzim ki enkòpore 25 nmol dNTP nan materyèl asid ensolubl nan 30 minit nan 65 ° C.
LAMP Reyaksyon
| Eleman | 25 μLSistèm |
| 10×HC Bst V2 tanpon | 2.5 μL |
| MgSO4 (100mM) | 1.5 μL |
| dNTPs (10mM chak) | 3.5 μL |
| SYTO™ 16 vèt (25×)a | 1.0 μL |
| Premye melanjb | 6 μL |
| Bst DNA Polymerase V2 (san glisewol) (32 U/uL) | 0.25 μL |
| Modèl | × μL |
| ddH₂O | Jiska 25 μL |
Nòt:
1) a.SYTOTM 16 Green (25 ×): Dapre bezwen eksperimantal, lòt koloran ka itilize kòm ranplasan;
2) b.Melanj Primer: jwenn nan melanje 20 µM FIP, 20 µM BIP, 2.5 µM F3, 2.5 µM B3, 5 µM LF, 5 µM LB ak lòt volim.
Reyaksyon ak kondisyon
1 × HC Bst V2 Tanpon, tanperati enkubasyon an se ant 60 ° C ak 65 ° C.
Inaktivasyon chalè
80 ° C, 20 minit.
