RT-LAMP Colormetric Master Mix HCB5204A
Pwodui sa a gen tanpon reyaksyon, RT-Enzymes Mix (Bst DNA polymerase ak transkriptaz ranvèse ki reziste chalè), Pwoteksyon lyofilize ak konpozan koloran chromogenic.Pou itilize, jis itilize tanpon, anzim reyaksyon an ak Jadendanfan melanje epi ajoute nan modèl la;ajoute pwoteksyon lyofilize ka dwat.Li te konekte ak yon lyophilizer ak lyophilize, epi sèlman primè yo ak modèl yo te ajoute lè yo itilize.Twous sa a bay yon rapid, klè deteksyon vizyèl nan anplifikasyon, ki reyaksyon negatif ki endike nan wouj ak reyaksyon pozitif endike pa yon chanjman nan jòn.
Eleman
| Eleman | HCB5204A-01 | HCB5204A-02 | HCB5204A-03 |
| Tanpon anplifikasyon loop-medyatè (ak lank) | 0.96 ml | 4.80 mL × 2 | 9.60 mL × 10 |
| Melanj RT-Anzim | 270 μL | 2.70 ml | 2.70 mL × 10 |
| Pwotektè lyofilize | 0.96 mL × 2 | 9.60 mL × 2 | 9.60 mL × 20 |
Aplikasyon
Pou anplifikasyon izotèmik ADN oswa RNA.
Kondisyon Depo
Transpòte ak glas sèk, ki estoke nan -25 ~ -15 ℃.Evite souvan friz-degel, pwodwi a valab pou 12 mwa.
Pwotokòl
1.Deglase tanpon reyaksyon yo dwe itilize nan tanperati chanm.Vortex yon ti tan oswa envèse tib plizyè fwa pou melanje byen, Lè sa a, santrifuje kolekte likid la nan pati anba a nan tib la.
2.Preparasyon nan sistèm reyaksyon.Reyaktif sa a ka prepare nan de sistèm reyaksyon, melanj reyaksyon likid ak melanj sistèm lyofilize.
1) Prepare melanj reyaksyon likid
| Eleman | Volim |
| Tanpon anplifikasyon loop-medyatè (ak lank) | 10 μL |
| Melanj RT-Anzim | 2.8 μL |
| 10 × Primer Mixa | 5 μL |
| Modèl ADN/RNA b | × μL |
| Dlo san nukleaz | Jiska 50 μL |
2) melanj sistèm lyofilizasyon
① Prepare melanj lyofilize
| Eleman | Volim |
| Tanpon anplifikasyon loop-medyatè (ak lank) | 10 μL |
| Pwotektè lyofilize | 20 μL |
| Melanj RT-Anzim | 2.8 μL |
| Dlo san nukleaz | Jiska 50 μL |
② Lyophilization: Mix prepare a te lyofilize nan yon sistèm 50μL
③ Prepare melanj reyaksyon
| Eleman | Volim |
| Melanj liofilize | 1 moso |
| 10 × Primer Mixa | 5 μL |
| Modèl ADN/RNA b | × μL |
| Dlo san nukleaz | Jiska 50 μL |
Nòt:
1) a.10×Primer Mix : 16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM Loop F/B;
2) b.DEPC (idrosolubl) rekòmande pou asid nikleyè templ.
1.Enkube nan 65 ° C pou 30-45 minit, ki ka pwolonje kòmsadwa dapre chanjman koulè Tan reyaksyon.
2.Dapre je a toutouni, jòn te pozitif ak wouj te negatif.
Nòt
1.Sèl ka parèt nan pati anba tib tanpon an, toubiyon yon ti tan oswa envèse tib plizyè fwa pou melanje byen nan tanperati chanm.
2.Tanperati reyaksyon an ka optimize ant 62 ℃ ak 68 ℃ selon kondisyon primè yo.
3.Reyaktif pake yo pa ta dwe ekspoze a lè pou yon tan long.
4.Reyaksyon dekolorasyon wouj ak jòn depann sou chanjman pH sistèm reyaksyon an, tanpri pa sèvi ak solisyon depo Tris asid nikleyik ki gen ladann, rekòmande pou itilize ddH.2O asid nikleyik ki estoke;
5.Eksperyans lan ta dwe estandadize, ki gen ladan preparasyon an nan sistèm nan reyaksyon, lyofilizasyon, ak pwosesis echantiyon ak pwosesis ajoute echantiyon;
6.Pou evite kontaminasyon, li rekòmande pou prepare sistèm reyaksyon an nan yon ban ultra-pwòp, nan lòt Ajoute modèl nan Hood lafimen nan sal la pou fè pou evite entèferans fo pozitif.
