Ultra Nuclease
UltraNuclease se yon enjenieri jenetik ki sòti nan Serratia marcescens, ki kapab degrade ADN oswa RNA, swa doub oswa yon sèl bloke, lineyè oswa sikilè nan yon pakèt kondisyon, konplètman degrade asid nikleyik nan oligonukleotid 5'-monofosfat ak longè 3-5 baz. .Apre modifikasyon jeni jenetik, pwodwi a te fèrmante, eksprime, ak pirifye nan Escherichia coli (E. coli), ki diminye viskozite nan selil supernatant ak rechèch syantifik selil lisat, men tou, amelyore efikasite pou pirifye ak rechèch fonksyonèl nan pwoteyin.Li kapab tou itilize nan terapi jèn, pirifikasyon viris, pwodiksyon vaksen, pwoteyin ak polisakarid endistri pharmaceutique kòm yon reyaktif pou retire asid nikleyik rezidi lame.
Karakteristik pwodwi
| Nimewo CAS | 9025-65-4 |
| EC No. | |
| Pwa molekilè | 30kDa |
| Pwen izoelektrik | 6.85 |
| Pwoteyin pite | ≥99%（ SDS-PAGE & SEC-HPLC） |
| Aktivite espesifik | ≥1.1×106U/mg |
| OptimumTemperature | 37°C |
| PH pi bon | 8.0 |
| Aktivite Proteaz | negatif |
| Biochay | ＜10CFU/100,000U |
| Pwoteyin rezidyèl lame-selil | ≤10ppm |
| Metal lou | ≤10ppm |
| Endotoxin bakteri | ＜0.25EU/1000U |
| Tanpon Depo | 20mM Tris-HCl, pH 8.0, 2mM MgCl2, 20mM NaCl, 50% glisewol |
Kondisyon depo
≤0 °C transpò；-25 ~ -15 °C Depo，2 ane validite (evite lè w konjele-dekonjle).
Definisyon inite
Kantite anzim yo itilize pou chanje valè absòpsyon △A260 pa 1.0 nan 30min nan 37 °C, pH 8.0, ekivalan a dijere 37μg somon espèm DNA pa koupe an oligonukleotid, te defini kòm yon inite aktif (U).
Kontwol kalite
Pwoteyin rezidyèl lame-selil: ELISA kit
•Pwoteaz Résidus: 250KU/mL UltraNuclease te reyaji ak substrate pou 60min, pa te detekte aktivite.
•Endotoxin bakteri: LAL-Test, Pharmacopeia of the People's Republic of China Volim 4 (2020 Edition) gel limit test method.Règ Jeneral (1143).
•Biochay: Farmakope Repiblik Pèp la Lachin Volim 4 (Edisyon 2020) — Jeneral
Règ pou tès esterilite (1101), PRC National Standard, GB 4789.2-2016.
•Metal lou:ICP-AES, HJ776-2015.
Operasyon
Aktivite UltraNuclease te siyifikativman anpeche lè konsantrasyon SDS te plis pase 0.1% oswa EDTA
konsantrasyon te plis pase 1mM.Surfactant Triton X-100, Tween 20 ak Tween 80 pa te gen okenn efè sou nuclease.
pwopriyete lè konsantrasyon an te anba 1.5%.
| Operasyon | Operasyon Optimal | Operasyon Valab |
| Tanperati | 37℃ | 0-45 ℃ |
| pH | 8.0-9.2 | 6.0- 11.0 |
| Mg2+ | 1-2mM | 1-15mM |
| DTT | 0-100mM | > 100mM |
| 2-Mercaptoethanol | 0-100mM | > 100mM |
| Monovalan metal ion (Na+, K+ elatriye) | 0-20mM | 0-200mM |
| PO43- | 0-10mM | 0-100mM |
Itilizasyon ak Dòz
• Retire asid nikleyik ekzojèn nan pwodwi vaksen yo, redwi risk pou toksisite rezidyèl asid nikleyik ak amelyore sekirite pwodwi yo.
• Diminye viskozite nan likid manje ki te koze pa asid nikleyik, diminye tan pwosesis ak ogmante sede pwoteyin.
• Retire asid nikleyik ki vlope patikil la (viris, kò enklizyon, elatriye), ki fezab
lage ak pirifye patikil la.
| Kalite eksperimantal | Pwodiksyon Pwoteyin | Viris, vaksen | Dwòg selilè |
| Nimewo Selil | 1g selil mouye pwa (resispann ak 10ml tanpon) | 1L fèmantasyon supernatant likid | 1L kilti |
| Dòz Minimòm | 250U | 100U | 100U |
| Dòz Rekòmande | 2500U | 25000U | 5000U |
• Tretman Nuclease ka amelyore rezolisyon ak rekiperasyon echantiyon an pou kolòn kwomatografi, elektwoforèz ak analiz blotting.
• Nan terapi jèn, yo retire asid nikleyik pou jwenn viris adeno-asosye pirifye.
