DNaz I (Rnase gratis) (5u/ul)
No chat: HC4007A
DNase I (Deoxyribonukleaz I) se yon endodeoxyribonukleaz ki ka dijere ADN sèl oswa doub.Li rekonèt epi fann lyezon fosfodiestè yo pou pwodui monodeoksinukleotid oswa oligodeksinukleotid sèl-oswa doub ak gwoup fosfat nan 5'-tèminal la ak idroksil nan 3'-tèminal la.Aktivite DNase I depann de Ca2+epi yo ka aktive pa iyon metal divalan tankou Mn2+ak Zn2+.5 mM Ca2+pwoteje anzim nan idroliz.Nan prezans Mg2+, anzim nan te kapab rekonèt owaza epi fann nenpòt ki sit sou nenpòt strand ADN.An prezans Mn2+, Seksyon doub ADN yo ka rekonèt ansanm ak fennen nan prèske menm sit la pou fòme fragman ADN plat oswa fragman ADN fen kolan ak 1-2 nukleotid ki vle pèse anvlòp.
Eleman
Non | 0.1KU | 1KU | 5 KU | 50 KU |
DNase I, RNase-gratis | 20μL | 200μL | 1mL | 10 ml |
10×DNase I tanpon | 1mL | 1mL | 5 × 1mL | 5 × 10 mL |
Kondisyon depo
-25 ℃ ~ -15 ℃ pou depo;Transpò anba pake glas.
Enstriksyon yo
1. Prepare solisyon reyaksyon an nan tib san RNase selon pwopòsyon ki endike anba la yo:
Eleman | Volim |
RNA | X µg |
10 × DNase I Tanpon | 1μL |
DNaz I, RNase-gratis (5U/μL) | 1 U pou chak µg RNA① |
ddH2O | Jiska 10μL |
Nòt: ①Kalkile volim DNase I ki bezwen ajoute dapre kantite RNA.
2. 37 ℃ pou 15 minit;
3. Ajoute 0.5M EDTA nan konsantrasyon final la nan 2.5mM ~ 5mM, epi chofe a 65 ℃ pou 10 minit pou sispann reyaksyon an.Echantiyon an ka itilize dirèkteman pou pwochen reyaksyon an tankou transcription inverseeksperyans.
Definisyon inite
Yon inite defini kòm kantite anzim ki pral konplètman degrade 1µg pBR322ADN nan 10 minit nan 37 ℃.
Kontwol kalite
RNase:5U nan DNase I ak 1.6µg MS2 RNA pou 4 èdtan nan 37℃ pa bay okenn degradasyon kòmdetèmine pa elektwoforèz jèl agarose.
Nòt
1. Tanpri prepare 0.5MEDTA poukont ou.
2. Sèvi ak 1U DNase I pou chak µg RNA.Sepandan, si RNA a mwens pase 1µg, tanpri itilize 1U DNase I.
3. Tanpri mete anzim la sou glas pandan operasyon an.