Rnase Inhibitor (san glisewol)
Murine RNase inhibitor se yon inibitè RNase murin recombinant eksprime ak pirifye nan E.coli.Li mare ak RNase A, B oswa C nan yon rapò 1:1 atravè lyezon ki pa kovalan, kidonk anpeche aktivite twa anzim yo epi pwoteje RNA kont degradasyon.Sepandan, li pa efikas kont RNase 1, RNase T1, S1 Nuclease, RNase H oswa RNase soti nan Aspergillus.Murine RNase inhibitor te teste pa RT-PCR, RT-qPCR ak IVT mRNA, e li te konpatib ak divès kalite transkriptaz ranvèse komèsyal, ADN polymerases ak RNA polymerases.
Konpare ak inibitè RNase imen, inibitè RNase murin pa gen de sistein ki trè sansib a oksidasyon ki lakòz inaktivasyon inibitè a.Sa fè li estab nan konsantrasyon ki ba nan DTT (mwens pase 1 mM).Karakteristik sa a fè li apwopriye pou itilize nan reyaksyon kote gwo konsantrasyon DTT se negatif nan reyaksyon an (egzanp an tan reyèl RT-PCR).
Aaplikasyon
Pwodui sa a ka lajman itilize nan nenpòt eksperyans kote entèferans RNase posib pou evite degradasyon RNA, tankou:
1.First-strand cDNA sentèz, RT-PCR, RT-qPCR, elatriye;
2.Pwoteje RNA kont degradasyon nan transkripsyon/tradiksyon in vitro (egzanp replikasyon viral nan vitro);
3.Anpèchman aktivite RNase pandan izòlman RNA ak pirifikasyon.
Kondisyon Depo
Sere nan -25～-15℃;
Sik friz-dekonjle ≤ 5 fwa;
Valab pou 1 ane.
Definisyon inite
Yon inite defini kòm kantite RNase Inhibitor ki nesesè pou anpeche aktivite 5 ng RNase A pa 50%.
Pwa molekilè
RNase Inhibitor (Glycerol-gratis) se yon pwoteyin 50 kDa.
Kontwol kalite
Egzonukleaz Aktivite:
Enkubasyon 40 U nan anzim ak 1 μg λ-Hind III dijere ADN pou 16 èdtan nan 37 ° C lakòz pa gen okenn degradasyon detekte nan ADN nan jan yo detèmine pa elektwoforèz jèl.
Aktivite endonukleaz:
Enkubasyon 40 U nan anzim ak 1 μg λ ADN pou 16 èdtan nan 37 ° C lakòz pa gen okenn degradasyon detekte nan ADN nan jan yo detèmine pa elektwoforèz jèl.
Nicking Aktivite:
Enkubasyon 40 U nan anzim ak 1 μg pBR322 pou 16 èdtan nan 37 ℃ lakòz pa gen okenn degradasyon detekte nan ADN nan jan yo detèmine pa elektwoforèz jèl.
RNase Aktivite:
Enkubasyon 40 U nan anzim ak 1.6 μg MS2 RNA pou 4 èdtan nan 37 ℃ lakòz pa gen okenn degradasyon detekte nan RNA a jan yo detèmine pa elektwoforèz jèl.
E.coli ADN:
TaqMan qPCR detekte 40 U nan anzim.ADN E.coli a se ≤ 0. 1pg/40U.
Notes
1.Pa souke oswa brase vyolanman pou anpeche inaktivasyon anzim.
2.RNase inhibitor aktif nan tanperati ki sòti nan 25℃ a 55℃ epi li inaktive nan ≥65℃.
3.Aktivite RNase H, RNase 1, ak RNase T1 pa anpeche.
4. Ranje pH la pou anpeche aktivite RNase lajè (aktif nan pH 5-9), montre aktivite maksimòm nan pH 7-8.
