Multiplex One Step RT-qPCR Premix
Deskripsyon
No chat: HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix se yon Multiplex PCR Kit ki baze sou RNA kòm modèl.Nan eksperyans la, transkripsyon ranvèse ak PCR quantitative yo fèt nan menm tib reyaksyon an, senplifye operasyon eksperimantal la ak diminye risk pou kontaminasyon.Ka konsepsyon inik nan melanj tanpon ak anzim dwe itilize nan yon sèl-etap sistèm lyofilize.Twous la itilize transkriptaz inverse ki reziste chalè pou fè sentèz efikas nan premye seksyon cDNA lè l sèvi avèk hotstart Taq DNA Polymerase pou anplifikasyon quantitative.Li gen tanpon reyaksyon optimize, melanj anzim elatriye, ak faktè ki efektivman anpeche anplifikasyon PCR ki pa espesifik ak amelyore efikasite anplifikasyon nan reyaksyon qPCR miltip yo te ajoute, sa ki pèmèt miltip fluoresans anplifikasyon quantitative pandan y ap asire efikasite anplifikasyon nan primè.
Eleman
| Non |
| 1. Lyo-tanpon |
| 2. Melanj Lyo-Anzim |
| 3. Lyo pwoteksyon |
Kondisyon transpòion
A: Lyo-tanpon ak pwoteksyon: -25 ~ -15 ℃, lavi etajè se 1 ane.
B: Lyo-anzim melanj, 2-8 ℃, lavi etajè se 6 mwa.
Enstriksyon pou operasyon
1. Sistèm reyaksyon (Pran 25μL kòm egzanp)
| Eleman | Volim (μL) | Final Konsantrasyon |
| Lyo-tanpon | 6 | 1* |
| Melanj Lyo-Anzim | 1 | - |
| Lyo-Pwotektè | 8 | - |
| Premye melanj (10μM) | 1 | 0.1- 1uM |
| Melanj sond (10μM) | 0.5 | 0.05-0.5uM |
| Modèl RNA | 5 | - |
| DEPC H2O | Jiska 25 | - |
2. Optimize Pwotokòl monte bisiklèt
1) Pwotokòl monte bisiklèt estanda
| Etap reyaksyon | Tanperati | Tan | Sik | |
| 1 | Ranvèse transcription | 50°Ca | 10min | 1 |
| 2 | Premye denaturasyon | 95°C | 5min | 1 |
| 3 | Reyaksyon anplifikasyon | 95°C | 15seg | 45 sik |
| 60°Cb | 30segc |
2) Pwotokòl monte bisiklèt vit
|
| Etap reyaksyon | Tanperati | Tan | Sik |
| 1 | Ranvèse transcription | 50°Ca | 2min | 1 |
| 2 | Premye denaturasyon | 95°C | 2seg | 1 |
| 3 | Reyaksyon anplifikasyon | 95°C | 1seg |
45 sik |
| 60°Cb | 13segc |
Remak:
a) Ranvèse transkripsyon: Tanperati a ka chwazi 42 ° C oswa 50 ° C pou 10-15 minit.
b) Reyaksyon anplifikasyon: Tanperati a ajiste selon valè Tm premye ki fèt yo.
c)Fluoresans siyal akizisyon: Tanpri mete pwosedi eksperimantal la selon kondisyon ki nanmanyèl enstriman.
Enfòmasyon teknik / Espesifikasyon
| Cho Start | Bati-an kòmanse cho |
| Metòd deteksyon | Primer-sonde deteksyon |
| Metòd PCR | Yon etap RT-qPCR |
| Kalite echantiyon | RNA |
Nòt
1. Pwodui sa a se pou itilizasyon rechèch sèlman.
2. Tanpri mete PPE ki nesesè yo, tankou rad laboratwa ak gan, pou asire sante w ak sekirite ou!
