Rnase A
Ribonukleaz A (RNaseA) se yon polipèptid ki gen 4 lyezon disulfid ak yon pwa molekilè apeprè 13.7 kDa.RNase A se yon andoribonukleaz ki espesyalman degrade RNA yon sèl-selon nan C ak U résidus.Espesyalman, klivaj la rekonèt kosyon fosfodiestè a ki te fòme pa 5'-riboz nan yon nukleotid ak gwoup fosfat la sou 3'-riboz la nan nukleotid pirimidin adjasan a, se konsa ke 2, 3'-cyclic fosfat yo idrolize nan 3 korespondan yo. ′nucleoside phosphates (egzanp pG-pG-pC-pA-pG clived pa RNase A pou jenere pG-pG-pCp ak A-PG).RNase A se pi aktif nan clivage RNA sèl-chachen.Konsantrasyon travay rekòmande se 1-100μG/mL, konpatib ak divès kalite sistèm reyaksyon.Yo ka itilize konsantrasyon sèl ki ba (0-100 mM NaCl) pou koupe RNA sèl, RNA doub, ak chenn RNA ki te fòme pa ibridasyon RNA-DNA.Sepandan, nan gwo konsantrasyon sèl (≥0.3 M), RNase A sèlman espesifikman kwoke RNA yon sèl-cheche.
RNase A se pi souvan itilize pou retire RNA pandan preparasyon ADN plasmid oswa ADN genomik. Si DNase aktif oswa ou pa aktif pandan pwosesis preparasyon an ka fasilman afekte reyaksyon an.Metòd tradisyonèl bouyi nan yon beny dlo ka itilize pou inaktive aktivite DNase.Pwodui sa a pa gen DNase ak proteaz, epi li pa mande tretman chalè anvan ou itilize.Anplis de sa, pwodui sa a ka itilize tou nan eksperyans byoloji molekilè tankou analiz pwoteksyon RNase ak analiz sekans RNA.
Kondisyon Depo
Pwodwi a ka estoke nan -25 ~ -15 ℃, valab pou 2 zan.
Enstriksyon yo
Sa a se youn nan metòd komen pou prepare solisyon depo RNase A.Li kapab tou prepare palòt metòd dapre metòd tradisyonèl yo nan laboratwa a oswa literati referans (tankoufonn dirèkteman nan 10 mM Tris-HCl, pH 7.5 oswa Tris-NaCl solisyon)
1. Sèvi ak 10 mM acetate sodyòm (pH 5.2) pou prepare 10 mg/mL solisyon depo RNase A.
2. Chofaj nan 100 ℃ pou 15 min
3. Refwadi nan tanperati chanm, ajoute 1/10 volim 1 M Tris-HCl (pH 7.4), ajiste pH li a 7.4 (pouegzanp, ajoute 500 ml 10g/ml RNase depo solisyon 1M Tris-HCL, PH7.4)
4. Sou-pake nan -20 ℃ pou depo nan frizè, ki ka estab pou jiska 2 zan.
[Nòt]: Lè w bouyi solisyon RNaseA nan kondisyon net, presipitasyon RNase ap fòme;Bouyi li nan yon pH pi ba, epi si gen presipitasyon, li ka obsève, ki ka koze pa prezans nan enpurte pwoteyin.Si yo jwenn sediman apre yo fin bouyi, enpurte yo ka retire pa santrifujasyon gwo vitès (13000rpm), ak Lè sa a, anba-chaje pou depo lè w konjele.
Enfòmasyon sou pwodwi
| Sinonim | Ribonukleaz I;ribonukleaz pankreyas;Ribonukleaz 3'-pirimidnooligonucleotidohydrolase;Rnase A;Endoribonulseuz I |
| Nimewo CAS | 9001-99-4 |
| Aparans | Poud blan lyofilize |
| Pwa molekilè | ~ 13.7kDa (sekans asid amine) |
| Valè Ph | 7.6 (ranje aktivite 6-10) |
| Tanperati apwopriye | 60 ℃ (ranje aktivite 15-70 ℃) |
| Aktive ajan | Na2+.K+ |
| Inibitè | Rnase Inhibiteur |
| Metòd inaktivasyon | Pa ka inaktive pa chofaj, li sijere yo sèvi ak kolòn santrifujeur |
| Orijin | Bovin |
| Solibilite | Soluble nan dlo (10 mg / ml) |
| Pèt sou sèk | ≤5.0% |
| Aktivite anzim | ≥60 Kunitz inite/mg |
| Pwen izoelektrik | 9.6 |
Nòt
Pou sekirite ak sante w, tanpri mete rad laboratwa ak gan jetab pou operasyon.
