Twous Ekstraksyon ADN/RNA viral
Twous sa a apwopriye pou fè ekstraksyon rapid ADN/RNA viral ki pite ki wo nan echantiyon tankou prelèvman nasopharyngeal, prelèvman anviwònman, supernatant kilti selilè, ak supernatant omojene tisi.Twous la baze sou teknoloji pou pirifye manbràn silica ki elimine nesesite pou itilize solvang òganik fenol / klowofòm oswa presipitasyon alkòl ki pran tan pou ekstrè viral ADN / RNA nan kalite siperyè.Asid nikleyik yo jwenn yo gratis nan enpurte epi yo pare pou itilize nan eksperyans en tankou transkripsyon ranvèse, PCR, RT-PCR, PCR an tan reyèl, sekans pwochen jenerasyon (NGS), ak Northern blot.
Kondisyon depo
Sere nan 15 ~ 25 ℃, epi transpòte nan tanperati chanm
Eleman
| Eleman | 100RXNS |
| Tanpon VL | 50 ml |
| Tanpon RW | 120 ml |
| RNase-gratis ddH2 O | 6 ml |
| Kolòn FastPure RNA | 100 |
| Tib koleksyon (2ml) | 100 |
| Tib koleksyon san RNase (1 .5ml) | 100 |
Tanpon VL:Bay yon anviwònman pou lysis ak obligatwa.
Tanpon RW:Retire rezidyèl pwoteyin ak lòt enpurte.
RNase-gratis ddH2O:Elite ADN/RNA nan manbràn nan kolòn vire a.
Kolòn FastPure RNA:Espesyalman adsorb DNA/RNA.
Tib koleksyon 2 ml:Kolekte filtrate.
Tib koleksyon san RNase 1.5 ml:Kolekte ADN/RNA.
Aplikasyon
Écouvillons nasopharyngeal, écouvillons anviwònman, supernatant kilti selilè, ak supernatant omojene tisi.
Oto-prepare Materials
RNase-gratis pipèt konsèy, 1.5 ml RNase-gratis tib santrifijeur, santrifujeur, mixer vortex, ak pipèt.
Pwosesis Eksperyans
Fè tout etap sa yo nan yon kabinè biosekirite.
1. Ajoute 200 μl echantiyon an nan yon tib santrifujeur RNase-gratis (fè moute ak PBS oswa 0.9% NaCl nan ka echantiyon ensifizan), ajoute 500 μl nan tanpon VL, melanje byen pa vortexing pou 15 - 30 segonn, epi santrifuje. yon ti tan pou kolekte melanj lan nan pati anba tib la.
2. Mete Kolòn FastPure RNA nan yon Tib Koleksyon 2 ml.Transfere melanj la soti nan Etap 1 a nan FastPure RNA Columns, santrifije a 12,000 rpm (13,400 × g) pou 1 minit, epi jete filtraj la.
3. Ajoute 600 μl Tanpon RW nan Kolòn RNA FastPure, santrifije nan 12,000 rpm (13,400 × g) pou 30 sec, epi jete filtraj la.
4. Repete Etap 3.
5. Santrifize kolòn vid la nan 12,000 rpm (13,400 × g) pou 2 min.
6. Ak anpil atansyon transfere Kolòn FastPure RNA nan yon nouvo Tib Koleksyon san RNase 1.5 ml (ki bay nan twous la), epi ajoute 30 – 50 μl ddH2O san RNase nan sant manbràn an san yo pa manyen kolòn nan.Kite kanpe nan tanperati chanm pou 1 min epi santrifije nan 12,000 rpm (13,400 × g) pou 1 min.
7. Jete Kolòn FastPure RNA yo.ADN / RNA a ka itilize dirèkteman pou tès ki vin apre, oswa estoke nan -30 ~ -15 ° C pou yon peryòd tan kout oswa -85 ~ -65 ° C pou yon peryòd ki pi long.
Nòt
Pou rechèch itilize sèlman.Pa pou itilize nan pwosedi dyagnostik.
1. Ekilibre echantiyon yo nan tanperati chanm davans.
2. Viris yo trè enfektye.Tanpri asire yo pran tout prekosyon sekirite ki nesesè yo anvan eksperyans lan.
3. Evite repete konjelasyon ak dekonjle echantiyon an, paske sa ka mennen nan degradasyon oswa pwodiksyon redwi nan ADN / RNA viral ekstrè.
4. Ekipman pwòp tèt ou-prepare gen ladan konsèy RNase-gratis pipèt, 1.5 ml RNase-gratis tib santrifujeur, santrifujeur, mixer vortex, ak pipèt.
5. Lè w ap itilize twous la, mete yon rad laboratwa, gan an latèks jetab, ak yon mask jetab epi sèvi ak consommables san RNase pou minimize risk kontaminasyon RNase.
6. Fè tout etap yo nan tanperati chanm sof si yo espesifye yon lòt jan.
Mekanis & Workflow
