Multiplex qPCR Probe Premix
Non chat: HCB5051A
TaqMan multiplex qPCR Master Mix (Dye Baze) se yon solisyon pre-pou 2 × anplifikasyon PCR quantitative an tan reyèl karakterize pa segondè sansiblite ak espesifik, ki se ble nan koulè, e li gen efè adisyon echantiyon.Pwodui sa a se yon 2× Melanje reyaktif pre-melanje ki pèmèt jiska kat reyaksyon PCR fliyoresan quantitative nan yon sèl reyaksyon byen.Pwodui sa a gen metòd antikò jenetikman modifye pou anzim Taq cho-start, anpil amelyore sansiblite anplifikasyon ak espesifik.An menm tan an, pwodui sa a te pwofondman optimize tanpon milti-reaksyon an, sa ki ka amelyore efikasite anplifikasyon reyaksyon an epi ankouraje anplifikasyon efikas modèl ki ba konsantrasyon.Pwodwi sa a ka itilize pou jenotip ak analiz quantitative multiplex.
Spesifikasyon
| Cho Start | Bati-an kòmanse cho |
| Metòd deteksyon | Primer-sonde deteksyon |
| Metòd PCR | qPCR |
| Polymerase | Taq DNA polymerase |
| Kalite echantiyon | ADN |
Kondisyon Depo
Se pwodwi a anbake ak glas sèk epi yo ka estoke nan -25 ~ -15 ℃ pou 2 ane.
Enstriksyon yo
1. ReyaksyonSistèm
| Eleman | Volim (μL) | Final Konsantrasyon |
| 2 × TaqMan multiplex qPCR Master Mix | 12.5 | 1× |
| Melanj premye (10 μmol / L) a | × | 0.1 - 0.5 μmol/L |
| Melanj sond (10 μmol/L)b | × | 50 - 250 nmol/L |
| Rox referans lank | 0.5 | 1× |
| Modèl ADN/cDNA | 1-10 | - |
| ddH2O | jiska 25 | - |
Nòt:Melanje byen anvan ou itilize pou evite bul twòp nan souke wòdpòte.
a.Primè konsantrasyon: Primer Mix gen plizyè pè primè, anjeneral chak primè nan yon konsantrasyon final 0.2 μmol / L epi yo ka ajiste tou ant 0.1 ak 0.5 μmol / L jan sa apwopriye.
b.Konsantrasyon sond: Sond Mix gen plizyè sond ak diferan siyal fliyoresan, epi konsantrasyon chak pwofonde ka ajiste ant 50 ak 250 nmol/L selon sitiyasyon espesifik.
1.Referans lank Rox: Yo itilize li sou enstriman anplifikasyon anplifikasyon PCR an tan reyèl tankou Applied Biosystems pou korije erè siyal fliyoresan ki pwodui ant pwi yo;pwodui sa a pa gen referans lank Rox.Cas#10200 rekòmande si sa nesesè.
2.Dilution modèl: qPCR trè sansib, epi li rekòmande pou delye modèl la pou itilize.Si modèl la se yon solisyon stock cDNA, volim modèl la pa ta dwe depase 1/10 nan volim total la.
3.Sistèm reyaksyon: 25μL, 30μL oswa 50 μL rekòmande pou asire efikasite ak repetibilite anplifikasyon jèn sib.
4.Preparasyon sistèm: Tanpri prepare nan ban an super pwòp, epi sèvi ak konsèy yo ak tib reyaksyon san rezidi nuclease;li rekòmande yo sèvi ak konsèy yo ak katouch filtre.Evite kontaminasyon kwaze ak kontaminasyon ayewosòl.
2.Pwogram reyaksyon
| Etap sik | Tanp. | Tan | Sik |
| Inisyal-denaturasyon | 95 ℃ | 5min | 1 |
| Denaturasyon | 95 ℃ | 15seg | 45 |
| Recuit / Ekstansyon | 60 ℃ | 30seg |
Nòt:
1.Recuit / Ekstansyon: Tanperati a ak tan ka ajiste kòmsadwa dapre valè Jadendanfan Tm ki fèt la.
2.Akizisyon siyal fliyoresans: Tan akizisyon siyal fluoresans ki nesesè pou diferan enstriman deteksyon qPCR diferan, tanpri mete dapre limit tan minimòm lan.Tan plizyè enstriman komen fikse jan sa a:
20 sec: Applied Biosystems 7700, 7900HT, 7500 Fast
31 sec: Applied Biosystems 7300
32 sec: Applied Biosystems 7500
Nòt
Tanpri mete PPE ki nesesè yo, tankou rad laboratwa ak gan, pou asire sante w ak sekirite ou!
