Multiplex One Step RT-qPCR Premix-UNG
Non chat: HCB5145A
Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus) se yon twous PCR quantitative multiplex ki baze sou RNA kòm modèl.Nan pwosesis la nan eksperyans la, transkripsyon ranvèse ak PCR quantitative te pote soti nan menm tib la, ki senplifye operasyon an eksperimantal ak redwi risk pou yo kontaminasyon.Nan twous sa a, premye strand cDNA te efikasman sentèz pa chalè-rezistan Reverse Transcriptase ak quantitatively anplifye pa HotStart Tag DNA Polymerase.Twous la sitou gen optimize tanpon MP, melanj anzim, elatriye. Solisyon an tanpon deja gen Mg2+ak dNTP.Anplis de sa, faktè sa yo ki ka efektivman anpeche anplifikasyon PCR ki pa espesifik ak amelyore efikasite anplifikasyon nan reyaksyon qPCR miltip yo ajoute, sa ki ka asire efikasite anplifikasyon ak pote soti nan reyaksyon anplifikasyon miltip.Sistèm dUTP/UDG te ajoute pou efektivman anpeche risk kontaminasyon aerosol.
Eleman
1. Tanpon
2. Melanj anzim
Spesifikasyon
| Cho Start | Bati-an kòmanse cho |
| Metòd deteksyon | Primer-sonde deteksyon |
| Metòd PCR | Yon etap RT-qPCR |
| Polymerase | Taq DNA polymerase |
| Kalite echantiyon | ADN |
Kondisyon Depo
Se pwodwi a anbake ak glas sèk epi yo ka estoke nan -25 ~ -15 ℃ pou 1 ane.Li ta dwe evite souvanfriz-degel.Li rekòmande pou konsève pou separeman.
Enstriksyon yo
1.Reyaksyon Sistèm
| Eleman | Volim (μL) | Final Konsantrasyon |
| 2 × MP tanpon | 12.5 | 1× |
| Melanj anzim | 1 | - |
| Melanj Primer/sond (2.5 μM) | 3 | 0.3μM |
| Modèl RNA | 1-10 | - |
| RNase gratis H2O | rive 25 | - |
Nòt:
Asire ou ke ou melanje byen anvan ou itilize, evite bul twòp ki te koze pa Vibration vyolan.
a.Primer konsantrasyon: Primer melanj ki gen ladann multiplex Jadendanfan, tou depann de sitiyasyon an pi bon konsantrasyon Jadendanfan petèt ant 0.l ak 1.0μM.
b.Konsantrasyon sond: Sond melanj ki gen ladann multiplex sond etikèt diferans gwoup fliyoresan, tou depann de sitiyasyon an pi bon konsantrasyon pwofonde petèt ant 0.05 ak 0.5μM.
c.Dilution modèl: qPCR trè sansib epi li rekòmande pou delye modèl la.Valè Ct kontwòl la apwopriye ant 20 ak 35.
d.Preparasyon sistèm: Tanpri prepare nan tab la k ap travay ultra pwòp, ak pipèt ak tib reyaksyon san rezidi nuclease;li rekòmande pou sèvi ak tèt zam ak eleman filtre.Evite kontaminasyon kwaze ak kontaminasyon ayewosòl.
2. Optimize monte bisiklètPwotokòl
| Sik etap | Tanp. | Tan | Sik |
| Ranvèse transcription | 50℃a | 20 minit | 1 |
| Inisyal-denaturasyon | 95℃ | 5min | 1 |
| Reyaksyon anplifikasyon | 95℃ | 15seg |
40-45 |
| 60℃ b | 30seg c |
Nòt:
a.Ranvèse transcription: Tanperati a ka chwazi 42 ° C oswa 50 ° C.
b.Reyaksyon anplifikasyon: Se tanperati a ajiste selon valè Tm nan primè ki fèt yo.
c.Akizisyon siyal fliyoresans: Tanpri mete pwosedi eksperimantal la selon kondisyon manyèl enstriman an.
Nòt
Tanpri mete PPE ki nesesè yo, tankou rad laboratwa ak gan, pou asire sante w ak sekirite w.
