Robustart Taq DNA Polymerase

Robustart Taq DNA Polymerase se yon ADN polymerase ki kòmanse cho.Pwodui sa a ka pa sèlman pi byen anpeche reyaksyon ki pa espesifik ki te koze pa rkwir ki pa espesifik nan primè oswa agrégation Jadendanfan nan pwosesis preparasyon sistèm PCR ak anplifikasyon.Se poutèt sa, li gen espesifik ekselan e li pi efikas pou anplifikasyon modèl konsantrasyon ki ba, epi li apwopriye pou reyaksyon anplifikasyon PCR multiplexed.Anplis, pwodui sa a gen yon aplikasyon trè bon, ak rezilta anplifikasyon ki estab ka jwenn nan diferan kalite reyaksyon PCR.

Eleman

1.5 U/μL Robustart Taq DNA polymerase

2.10 × PCR Tanpon II (Mg²+ gratis) (si ou vle)

3.25 mM MgCl₂(opsyonèl)

* 10 × PCR Tanpon II (Mg²+ gratis) pa genyen dNTP ak Mg²+, tanpri ajoute dNTPs ak MgCl₂lè w ap prepare sistèm reyaksyon an.

Aplikasyon Rekòmande

1.Anplifikasyon rapid.

2.Plizyè anplifikasyon.

3.Anplifikasyon dirèk nan san, prelèvman, ak lòt echantiyon.

4.Deteksyon maladi respiratwa.

Kondisyon Depo

-20 ° C pou depo alontèm, yo ta dwe melanje byen anvan ou itilize, evite souvan friz-degel.

*Si presipitasyon rive apre refrijerasyon, li nòmal;li rekòmande pou ekilibre nan tanperati chanm anvan melanje ak itilize.

Definisyon inite

Yon inite aktif (U) defini kòm kantite anzim ki enkòpore 10 nmol dezoksiribonukleotid nan materyèl asid ki pa ka fonn nan 74 ° C pou 30 minit lè l sèvi avèk ADN espèm somon aktive kòm modèl / premye.

Kontwol kalite

1.SDS-PAGE elektwoforetik pite pi gran pase 98%.

2.Sansiblite anplifikasyon, kontwòl pakèt-a-pakèt, estabilite.

3.Pa gen aktivite nukleaz ekzojèn, pa gen endonukleaz ekzojèn oswa kontaminasyon eksonukleaz

Enstriksyon yo

Enstalasyon reyaksyon

Nòt:

1) a.Tanpon an pa genyen dNTP ak Mg²+, tanpri ajoute dNTP ak MgCl₂lè w ap prepare sistèm reyaksyon an.

2) b.Si yo itilize pou qPCR/qRT-PCR, yo ta dwe ajoute sond fliyoresan nan sistèm reyaksyon an.Anjeneral, yon konsantrasyon primè final nan 0.2 μM pral bay bon rezilta;si pèfòmans reyaksyon an se pòv, konsantrasyon Jadendanfan an ka ajiste nan seri a nan 0.2-1 μM.Konsantrasyon an pwofonde anjeneral optimize nan seri a nan 0.1-0.3 μM.Eksperyans gradyan konsantrasyon ka fèt pou jwenn pi bon konbinezon Jadendanfan ak pwofonde.

Pwotokòl tèmik monte bisiklèt

Nòt

1.Pousantaj anplifikasyon ADN polymerase rapid pa ta dwe mwens pase 1 kb/10 s.Ogmantasyon tanperati a ak pousantaj tonbe, mòd kontwòl tanperati ak efikasite kondiksyon chalè diferan enstriman PCR varye anpil, kidonk li rekòmande pou optimize kondisyon reyaksyon pi bon pou enstriman PCR rapid espesifik la.

2.Sistèm nan trè adaptab, ak pi wo espesifik ak sansiblite.

3.Apwopriye pou itilize kòm reyaktif deteksyon PCR sansiblite segondè, epi yo ka itilize nan reyaksyon anplifikasyon PCR multiplex.

4.5′→3′ aktivite polymerase, 5′→3′ aktivite eksonukleaz;pa gen aktivite 3′→5′ eksonukleaz;pa gen fonksyon koreksyon.

5.Apwopriye pou tès kalitatif ak quantitative PCR ak RT-PCR.

6.Fen 3′ nan pwodwi PCR la se A, ki ka klonaj dirèkteman nan yon vektè T.

7.Metòd twa etap yo rekòmande pou primè ak tanperati rkwit ki ba oswa pou anplifikasyon fragman ki pi long pase 200 bp.