Inivèsèl SYBR GREEN qPCR Premix (Ble)

Non chat: HCB5041B

Universal Blue qPCR Master Mix (Dye Baze) se yon solisyon pre-anplifikasyon PCR 2 × an tan reyèl ki karakterize pa segondè sansiblite ak espesifik, se ble nan koulè, e li gen efè echantiyon adisyon trase.Eleman debaz Taq DNA polymerase la sèvi ak antikò demaraj cho pou efektivman anpeche anplifikasyon ki pa espesifik akòz rkwir Jadendanfan pandan preparasyon echantiyon an.An menm tan an, fòmil la ajoute faktè pwomosyon pou amelyore efikasite anplifikasyon reyaksyon PCR ak egalize anplifikasyon jèn ak diferan kontni GC (30 ~ 70%), pou PCR quantitative ka jwenn yon bon relasyon lineyè nan yon lajè quantitative. rejyon an.Pwodui sa a gen espesyal ROX Pasive Reference Dye, ki aplikab pou pifò enstriman qPCR.Li pa nesesè pou ajiste konsantrasyon ROX sou diferan enstriman.Li nesesè sèlman pou ajoute primè ak modèl pou prepare sistèm reyaksyon an pou anplifikasyon.

Eleman

Universal Blue qPCR Master Mix

Kondisyon depo

Se pwodwi a anbake ak pake glas epi yo ka estoke nan -25 ℃ ~ -15 ℃ pou 18 mwa.Li nesesè pou fè pou evite fò iradyasyon limyè lè estoke oswa prepare sistèm reyaksyon an.

Spesifikasyon

Enstriksyon yo

1.Sistèm reyaksyon

[Remak]: Melanje byen anvan ou itilize pou evite bul twòp nan souke wòdpòte.

a) Konsantrasyon Jadendanfan: Final konsantrasyon Jadendanfan an se 0.2μmol / L, epi li ka ajiste tou ant 0.1 ak 1.0μmol / L jan sa apwopriye.

b) Konsantrasyon modèl: Si modèl la se solisyon stock cDNA san dilusyon, volim yo itilize pa ta dwe depase 1/10 nan volim total reyaksyon qPCR la.

c) Dilution modèl: Li rekòmande pou delye solisyon stock cDNA a 5-10 fwa.Kantite pi bon modèl ajoute pi bon lè valè Ct yo jwenn pa anplifikasyon se 20-30 sik.

d) Sistèm reyaksyon: Li rekòmande pou itilize 20μL oswa 50μL pou asire efikasite ak repetibilite anplifikasyon jèn sib.

e) Preparasyon sistèm: Tanpri prepare nan ban an super pwòp epi sèvi ak konsèy yo ak tib reyaksyon san rezidi nuclease;li rekòmande yo sèvi ak konsèy yo ak katouch filtre.Evite kontaminasyon kwaze ak kontaminasyon ayewosòl.

2.Pwogram reyaksyon

Pwogram estanda

Pwogram rapid

[Remak]: Pwogram rapid la apwopriye pou a vas majorite de jèn, ak pwogram estanda yo ka eseye pou endividyèl konplèks jèn estrikti segondè.

a) Tanperati recuit ak tan: Tanpri ajiste selon longè Jadendanfan ak jèn sib.

b) Akizisyon siyal fluoresans (★): Tanpri mete pwosedi eksperimantal la selon kondisyon ki nan enstriksyon yo pou itilize enstriman an.

c) Koub k ap fonn: Pwogram default enstriman an ka itilize nòmalman.

3. Analiz rezilta 

Yo te mande yon minimòm de twa replike byolojik pou eksperyans quantitative.Apre reyaksyon an, koub anplifikasyon ak koub k ap fonn bezwen konfime.

3.1 Koub anplifikasyon:

Koub anplifikasyon estanda a gen fòm S.Analiz kantitatif pi egzak lè valè Ct la tonbe ant 20 ak 30. Si valè Ct se mwens pase 10, li nesesè pou delye modèl la epi pote tès la ankò.Lè valè Ct a se ant 30-35, li nesesè pou ogmante konsantrasyon modèl la oswa volim sistèm reyaksyon an, pou amelyore efikasite anplifikasyon epi asire presizyon analiz rezilta a.Lè valè Ct a pi gran pase 35, rezilta tès yo pa ka analize quantitatively ekspresyon jèn nan, men yo ka itilize pou analiz kalitatif.

3.2 Koub k ap fonn:

Pik sèl nan koub la k ap fonn endike ke espesifik reyaksyon an bon epi yo ka fè analiz quantitative;si koub la k ap fonn montre pik doub oswa miltip, analiz quantitative pa ka fèt.Koub la k ap fonn montre pik doub, epi li nesesè pou jije si pik ki pa sib la se dimè Jadendanfan oswa anplifikasyon ki pa espesifik pa elektwoforèz ADN agarose jèl.Si li se yon dimè Jadendanfan, li rekòmande pou diminye konsantrasyon Jadendanfan an oswa redesign Jadendanfan ak efikasite anplifikasyon segondè.Si se anplifikasyon ki pa espesifik, tanpri ogmante tanperati rkwit la, oswa redesign primè yo ak espesifik.

Nòt

Tanpri mete PPE ki nesesè yo, tankou rad laboratwa ak gan, pou asire sante ou ak sekirite!

Pwodwi sa a se pou rechèch itilize SÈLMAN!