Yon etap RT-qPCR SYBR Green Premix
Non chat: HCB5140A
One Step RT-qPCR Syber Green Premix se pou quantifikasyon fluoresans ki baze sou SYBR Green I lank.Sèvi ak premye jèn espesifik, transkripsyon ranvèse ak reyaksyon qPCR yo fini nan yon sèl tib, elimine nesesite pou repete bouchon-ouvèti ak operasyon pipet, anpil amelyore efikasite tès ak diminye risk pou kontaminasyon.Pou echantiyon RNA, twous la anplwaye Reverse Transcriptase ki reziste chalè pou sentèz cDNA efikas ak HotStart Taq DNA Polymerase pou anplifikasyon quantitative.Anba sistèm tanpon optimize a, sansiblite twous la ka rive jiska 0.1 pg pou sib ki trè eksprime ak 1 pg pou sib modere eksprime.Twous la apwopriye pou anplifikasyon ak quantifikasyon echantiyon ADN.Li pèmèt deteksyon sansib ak quantification nan asid nikleyik ki soti nan diferan echantiyon plant ak bèt, selil ak mikwo-òganis.
Eleman
| No | Non | Volim | Volim |
| 1 | Tanpon avanse | 250 μL | 2 × 1.25 mL |
| 2 | Melanj anzim avanse | 20 μL | 200 μL |
| 3 | RNase gratis H2O | 250 μL | 2 × 1.25 mL |
Kondisyon Depo
Pwodwi sa a ta dwe estoke nan -25 ~ -15 ℃ lwen limyè pou 1 ane.
Enstriksyon yo
1.Reaction sistèm konfigirasyond
| Eleman | Volim (μL) | Volim (μL) | Final konsantrasyon |
| Tanpon avanse | 12.5 | 25 | 1× |
| Melanj anzim avanse | 1 | 2 | - |
| Forward Primer (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0.2 μmol / L |
| Reverse Primer (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0.2 μmol / L |
| RNA Tamplateb | X | X | - |
| RNase gratis H2Oc | rive 25 | rive 50 | - |
Nòt:
1) a.TFinalman konsantrasyon primè a te 0.2 μmol / L, ki ta ka ajiste tou ant 0.1 ak 1μmol / L jan sa apwopriye.
2) b.Reyaktif la trè sansib, ak RNA total nan seri a nan 1pg-1μg, ak tès echantiyon imen yo te montre yon opinyon pi bon nan 1 pg-100 ng, kontwole pou yon valè jeneral Ct nan seri a nan 15-30 jan sa apwopriye.
3) c.Li rekòmande pou itilize 20μL oswa 50μL pou asire validite ak repwodiksyon anplifikasyon jèn sib la.
4) d.Tanpri prepare nan ban ultra-pwòp la epi sèvi ak konsèy nuclease san rezidi ak tib reyaksyon;konsèy ak katouch filtre yo rekòmande.Evite kontaminasyon kwaze ak kontaminasyon ayewosòl.
2.Pwogram reyaksyon
| Etap sik | Tanp. | Tan | Sik |
| Ranvèse transcription | 50℃a | 6 minit | 1 |
| Premye denaturasyon | 95℃ | 5min | 1 |
| Reyaksyon anplifikasyon | 95℃ | 15 sec | 40 |
| 60℃b | 30 sec | ||
| Etap koub k ap fonn | Defo enstriman | 1 | |
Nòt:
1) a.Tanperati transkripsyon ranvèse a ka chwazi ant 50-55 ° C selon bezwen eksperimantal yo.Pou echantiyon ADN, pwosesis transkripsyon ranvèse a ka omisyon.
2) b.Nan ka espesyal tanperati a recuit / ekstansyon ka ajiste selon valè a Jadendanfan Tm, 60 ° C rekòmande.
Nòt
1. Pwodui sa a se pou itilizasyon rechèch sèlman.
2. Tanpri opere ak rad laboratwa ak gan jetab, pou sekirite ou.
